Pembuatan Kit ELISA untuk Deteksi Avian Influenza menggunakan Antigen Virus Isolat Lokal

Avian Influenza (Al) merupakan penyakit infeksius penting pada unggas yang disebabkan oleh virus avian influenza (VAI) tipe A dari kelompok Orthomyxoviridae. Penyebaran highly pathogenic avian influenza (HPAI) subtipe H5N1 di beberapa negara di dunia mengancam populasi hewan dan kesehatan masyarakat. Diagnosis yang efektif dan manajemen kontrol yang tepat sangat dibutuhkan untuk pengendalian penyakit ini. Pada saat ini di Indonesia belum ada kit ELISA komersial mempergunakan antigen virus isolat lokal. Dalam penelitian ini telah dilakukan pembuatan kit ELISA menggunakan antigen RNP VAI dan antigen komersial (Pusvetma) VAI H5N1 isolat asal Indonesia untuk deteksi antibodi spesifik Al.
Hasil pengujian ELISA menunjukkan, pada berbagai level pengenceran serum, nilai absorbansi (OD) serum standar positif selalu lebih tinggi dibandingkan serum negatif. Pada pengenceran serum terpilih rasio P/N yang dicapai kit ELISA menggunakan antigen RNP sebesar 1,052 sedangkan untuk kit ELISA menggunakan antigen komersial sebesar 1,051, dengan OD pada kontrol antigen masing-masing sebesar 0,381 dan 0,348; kontrol serum sebesar 0,978 dan 1,092.
Dari hasil penelitian tersebut dapat disimpulkan bahwa nilai OD serum standar positif selalu lebih besar dibandingkan dengan serum negatif. Fenomena background yang muncul diduga terjadi akibat proses pemurnian antigen yang belum optimal. Sedangkan rasio P/N yang kecil terjadi karena titer antibodi serum standar positif yang rendah.