Pembuatan Antigen Murni untuk Memproduksi Polivalen Antibodi dan Vaksin Aeromonas Hydrophila

Penyakit Motil Aeromonas Septicemia (MAS) yang disebabkan oleh bakteri Aeromonas hydrophila merupakan penyakit bakterial terpenting pada budidaya ikan air tawar. Berbagai usaha penanggulangan telah diterapkan oleh petani ikan termasuk perbaikan pengelolaan dan penggunaan obat-obatan, namun belum memberikan hasil yang memuaskan. Vaksinasi dapat merupakan cara penanggulangan penyakit MAS yang efektif dan efisien. Permasalahan utama dalam vakninasi adalah belum tersedianya antigen (Ag) yang betul-betul imunogenik dan protektif serta dapat dipakai secara luas.
Penelitian ini bertujuan untuk : mendapatkan antigen murni, membuat antibodi dari polivalen antigen murni, membuat vaksin dari sel utuh dan antigen murni, uji diagnosis serologi dan uji efikasi vaksin monovalen dan polivalen baik sel utuh maupun antigen murni terhadap benih lele dumbo.
Bakteri yang akan digunakan dalam penelitian ini adalah isolat A. hydrophila yang bersifat common antigen dan imunogenik sebagai hasil penelitian tahun I, yaitu isolat JLB dan GLE.
Pemurnian antigen dilakukan terhadap LPS, flagela, protein dan pili dengan metode purifikasi atau fraksionasi. Antigen murni yang diperoleh kemudian diuji secara serologi untuk memilih yang betul-betul imunogenik. Antigen yang imunogenik digunakan untuk memproduksi polivalen antibodi dan digunakan sebagai vaksin.
Pembuatan antibodi dilakukan dengan menyuntikkan polivelen Ag murni pada tikus. Serum darah tikus yang tersebut digunakan untuk uji diagnosis A. hydrophila. Diagnosis ini akan dilakukan terhadap ikan yang diinfeksi buatan mauapun dari lapangan.
Pengujian efikasi vaksin bertujuan untuk mendapatkan jenis dan cara vaksinasi yang baik pada benih lele dumbo. Jenis vaksin yang digunakan adalah antigen sel utuh dan antigen murni baik monovalen maupun polivalen. Sedangkan cara vaksinasi yang akan diuji adalah rendaman, oral dan suntikan. Pengujian efikasi vaksin dilakukan dengan menginfeksi iakan yang telah divaksinasi dengan bakteri pada konsentrasi LC-50.
Analsis akan dilakukan terhadap persentase kematian. Relative Percent Survival (RPS) dan rata-rata waktu kematian dengan sidik ragam (Anova), sedang untuk mengetahui ada tidaknya beda nyata antara rata-rata perlakuan dilakukan dengan uji DMRT (Duncan's Multiple Range Test).
Penelitian telah melakukan pemurnian isolasi dan karakterisasi antigen murni dari isolat A. hydrophila. Penelitian yang sedang berjalan dan akan segera mendapatkan hasilnya adalah pengujian imunogenisitas antigen murni. Pegujian lain yang sedang berjalan adalah pengujian efikasi vaksin dari antigen sel utuh.