Pengembangan Metode Baru Untuk Mendeteksi Kesegaran Hasil Perikanan Menggunakan Imobilisasi 5'-Nukleotidase Dan Adpase Dalam Bentuk Paper Strip

Dalam era perdagangan bebas, kualitas merupakan faktor penentu bagi produk perikanan, baik untuk segi keamanan pangan maupun nilai ekonomisnya. Ikan segar ba-nyak mengandung senyawa ADP dan IMP yang mana masing-masing dapat dideteksi secara enzimatis dengan enzim ADP-ase dan 5'-Nukleotidase. Penelitian ini bertujuan un tuk membuat alat deteksi kesegaran hasil perikanan menggunakan ensim 5-Nukleotidase dan ADP-ase yang diamobilkan dalam bentuk diagnostic paper strip.

Penelitian ini terbagi dalam dua tahap, masing-masing satu tahun.

Tahun pertama mengkarakterisasi sifat ensim, mempelajari teknik amobilisasi pada berbagai matriks, stabilitas selama penyimpanan dan reliabilitasnya dalam mendeteksi kesegaran ikan.

Tahun kedua menguji performance ensim amobil dalam mendeteksi kesegaran ikan de-ngan metode pengujian standar yang berlaku secara internasional (di Jepang dikenal de-ngan nama nilai-K). Laporan ini adalah merupakan hasil penelitian selama tahun pertama.

Laporan ini adalah merupakan hasil penelitian selama tahun pertama

Enzim 5-Nukleotidase dan ADPase diamobilkan dalam matriks alginat, karaginan dan poliakrilamid menggunakan metode penjeratan (entrapment). Uji aktivitas kedua en-zim amobil tersebut berdasarkan adanya warna biru pada gel. Baik enzim 5'-nukleotidase maupun ADPase memberikan intensitas perubahan warna yang semakin biru dengan sema-kin tingginya substrat. Enzim 5'-nukleotidase amobil mempunyai dua pH otimum yaitu 7,5 dan 9 sedangkan enzim ADP-ase amobil mempunyai pH optimum 6. Kondisi pH opti-mum tersebut sama untuk semua jenis matriks yang dicoba. Dalam matriks gel poliakril-amide, aktivitas kedua enzim amobil mulai terlihat jelas pada suhu inkubasi suhu ruang (27 °C) dan tidak ada perbedaan intensitas warna biru sampai suhu 45 °C, kemudian di atas suhu ini aktivitas keduanya menurun. Enzim 5'-nukleotidase dan ADPase dalam matriks poliakrilamide lebih stabil dibandingkan dalam matriks yang lain, walaupun demikian masih dicari kondisi penyimpanan yang baik untuk kedua enzim amobil ini. Hasil pengujian kesegaran daging ikan selama penyimpanan menggunakan kedua enzim amobil ini menunjukkan adanya interferensi karena adanya unsur fosfat anorganik bebas dalam ekstrak ikan. Pada akhir tahun pertama sampai awal tahun kedua nanti, hal ini akan diatasi dengan berbagai cara.

Rencana penelitian tahun kedua adalah menguji performance enzim amobil dalam bentuk diagnostic paper strip pada ikan dengan mengatasi adanya interferensi fosfat anorganik bebas. Selanjutnya melakukan konfirmasi prosedur pengujian antara pengujian dengan enzim amobil dengan metode pengujian yang telah berlaku internasional (terutama di Jepang) dengan pengukuran nilai-K menggunakan HPLC.